Влияние пулирования мезенхимальных стволовых клеток на подавление пролиферативной активности Т-лимфоцитов

Abstract

Цель исследования. Определить влияние пулирования (объединения) одиночных культур мезенхимальных стволовых клеток обонятельной выстилки (МСК ОВ) носовой полости на подавление пролиферативной актив- ности Т-лимфоцитов. Материалы и методы. Методом проточной цитометрии была проведена оценка влияния пулирования одиночных культур МСК ОВ, полученных от здоровых доноров (n = 7), на митоген-индуцированную пролиферацию Т-лимфоцитов периферической крови добровольцев (n = 5). Оценку индекса пролиферации и числа поделившихся CD3+ клеток проводили по изменению интенсивности флуоресценции красителя Tag-it Vio. Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием непараметрических методов. Результаты. С учетом использования пяти образцов периферической крови добровольцев выполнена оценка 35 вариантов сокультивирования одиночных МСК с Т-клетками и 33 вариантов сокультивирования пулМСК с Т-клетками. Был установлен ингибирующий эффект как одиночных (р = 0,0001), так и пулМСК ОВ (р = 0,0001) на ФГА-индуцированную пролиферацию CD3+ Т-клеток суммарной фракции лимфоцитов периферической крови. Показано, что пулМСК ОВ оказывают достоверно более выраженный супрессивный эффект на пролиферацию Т-клеток в сравнении с одиночными МСК (р = 0,000004). Заключение. ПулМСК оказывают достоверно более выраженный эффект в отношении подавления ФГА-индуцированной пролиферации Т-клеток периферической крови в сравнении с монокультурами МСК, что обосновывает применение пулМСК в медицине с целью достижения лучших результатов в лечении иммуноопосредованных заболеваний.

Objective. To determine the effect of pooling (merging) of single cultures of olfactory mucosa-derived mesenchymal stem cells (MSCs) of the nasal cavity on the suppression of the proliferative activity of T-lymphocytes. Materials and methods. Using flow cytometry, the effect of pooling single cultures of MSCs obtained from healthy donors (n=7) on the mitogen-induced proliferation of T-lymphocytes in the peripheral blood of volunteers (n=5) was studied. The proliferation index and the number of dividing CD3+ T-cells were assessed by changes in the fluorescence intensity of Tag-it Vio. Statistical processing of the obtained data was carried out using non-parametric statistics. Results. An evaluation of 35 variants of co-culture of single MSCs with T-cells and 33 variants of co-culture of pooled MSCs with T-cells was performed. The inhibitory effect of both single (p = 0.0001) and pooled MSCs (p = 0.0001) on PHA-induced proliferation of CD3+ T-cells in the total fraction of peripheral blood lymphocytes was identified. It was shown that pooled MSCs have a significantly more pronounced suppressive effect on T-cell proliferation compared to single MSCs (p=0.000004). Conclusion. PoolMSCs have a significantly more pronounced effect in suppressing PHA-induced proliferation of peripheral blood T-cells compared to MSC monocultures, which justifies the use of poolMSCs in medicine to achieve better results in the treatment of immune-mediated diseases.